頭孢氨芐有關物質的檢測方案
頭孢氨芐（Cefalexin） 抗生素β-內酰胺類頭孢菌素類。它能抑制細胞壁的合成，使細胞內容物膨脹至破裂溶解，殺死細菌。因其生產過程中引入的雜質主要有以下兩種：?
-7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸-
7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（7ADCA)是合成頭孢氨芐、頭孢拉定、頭孢羥氨芐等頭孢品種的主要中間體?；瘜W名：3-甲基-7-氨基-8氧代-5硫雜-1-氧雜雙環【4、2、0】辛-2-烯=2=甲酸，本品為白色或類白色結晶性粉末，幾乎不溶于水，醇和丙酮。
-α-苯甘氨酸-
α-苯甘氨酸及其衍生物是一種重要的醫藥中間體，常用于合成氨芐青霉素、頭孢氨芐、頭孢拉定等β－內酰胺類抗生素，也用于合成多肽激素和多種農藥。本品為白色或類白色結晶性粉末，不溶于一般的有機溶劑。
1、儀器與試劑
? ? 1.1儀器、設備
? ??LC-600液相色譜儀（南京科捷）
? ? 色譜柱：250mm×4.6mm×5μm
? ? 分析天平
? ? 針頭過濾器
? ? 微孔濾膜：0.45μm
? ? 1.2試劑
? ? 甲醇（HPLC）
? ? 磷酸二氫鈉（AR）
? ? 氫氧化鈉 （AR）? ??
2、供試品溶液和對照品溶液的制備
? 對照品品溶液的制備 ?取7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸，α-苯甘氨酸對照品各約10mg，置同一100ml容量瓶中，加PH為7.0的磷酸鹽緩沖液約20ml，超聲使溶解，再用流動相A稀釋定容至刻度，搖勻，精密量取5.0ml，置50ml容量瓶中，用流動相A定容至刻度，搖勻，作為雜志對照品溶液。
? 供試品溶液的制備 ?精密稱取本品0.0500g，置50ml容量瓶中，加流動相A溶解并稀釋定容至50ml，制成每1ml中含1.0mg的溶液，作為供試品溶液樣品對照的制備，精密量取1ml供試液置100ml容量瓶中，用流動相A稀釋定容至100ml，搖勻，作為對照溶液。
?
3、色譜條件
? ? 色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 μm
? ? 流動相：以0.2mol/l磷酸二氫鈉溶液為流動相A，以甲醇為流動相B，梯度脫洗；
? ? 波長：220nm
? ? 流速：1. 0 mL/min
4、測定法
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液及樣品對照溶液各20ul，注入液相色譜儀，測定，即得
5、譜圖
?
儀器配置：
|
型號名稱 |
配置 |
數量 |
|
? ? 液相色譜儀LC-600A （智能全控） ? |
UV600紫外檢測器 |
??1臺 |
|
P600恒流泵（0.001～9.999ml/min）? |
2臺 |
|
|
美國原裝進口7725i進樣閥（含支架） |
1只 |
|
|
100ul進樣針 |
1只 |
|
|
梯度混合器 |
1只 |
|
|
工具包（含管路托盤） |
1只 |
|
|
液相色譜柱 |
250×4 .6,5um ??C18進口 |
1根 |
|
分析天平 |
200g.1mg |
1臺 |
|
JL-120DTH超聲波清洗器 |
加熱 ???3L |
1臺 |
|
KJ330色譜柱溫箱 |
恒溫誤差±0.1℃ |
1臺 |
|
溶劑過濾器 |
含真空泵 |
1套 |
|
濾膜 |
有機、水系過濾膜 ?2盒 有機、水系過濾器 ?2盒 ??? |
1套 |
|
流動相儲液瓶 |
? |
2只 |
|
電腦、打印機 |
? |
1套 |
?
?
